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(THC)和(CBD)的制备
发布时间:2019-04-29   点击次数:478次

用于分析的药用cannabis植物样品的制备

(THC)和(CBD)的制备
使用植物基因组学微孔板


    随着用于医药和研究目的的cannabis合法化程度的提高,对其有效成分的准确和高通量分析的需求急剧增加。

    重要的两个是影响神经活动的 THC 和具有治疗作用的镇痛 CBD。
    THC 和 CBD 的比例对于区分药用
cannabis和休闲cannabis至关重要。这个比例对税务机关,医疗监管机构和种植者都很重要。

 

THC / CBD 比率的测定
    准确测定 THC / CBD 比率是通过
cannabis的叶、芽和花样品的有效样品制备来确定的。 传统的样品制备方法, 使用珠磨或研磨机来均化这些材料。 当在聚丙烯微孔板中进行时,这些机器施加的极大的力通常会导致板损坏,导致开裂,泄漏并最终导致交叉污染。

    出于分析的目的,期望确定总 THC。这将包括无羧酸盐形式(THCA)以及热转化形式——THC。 医学价值是 CBD 含量,其再次必须总计包括天然羧酸形式。 高效液相色谱(HPLC)可以在转化为相应的游离形式的 THC 和 CBD 之前鉴定 THCA 和 CBD的酸组分,因此通常优选用于口服酊剂和cannabis产品。 气相色谱(GC)分析的缺点是热喷射器中 THCA 和TBDA 的破坏可能使得 THC / TBD 比率的最终确定不准确。
    因此,HPLC / UV 或 LC / MS 应该是优先选的分析方法。 以下方法也可用于制剂和原料植物材料。


所需设备耗材:
• 2ml 96 孔研磨板 219030
• 研 96 孔磨板盖垫 219004
• 真空歧管 228008
• 蛋白质沉淀板 240100
• Porvair Sciences Minivap 96 孔螺旋针头氮吹仪 (229206 & 229072)
• Porvair Sciences 混匀仪配 3 个适配器 (229651 & 229654)
• Porvair Sciences 2.2ml 96 孔深孔板 (219009)
• 研磨设备


制备方法:

  • 对于 THC / CBD 比率分析,应随机抽取cannabis叶、芽和花的样本(如果有的话)。我们建议在 Porvair 229030
  • 植物基因组学板(研磨板)的每个孔中准确称量约 50mg 干燥的植物材料。
  •  在 229030 研磨板上添加 3 x 3mm 钢或镍研磨球(如果研磨种子材料需要镍)。
  •  219004 盖垫盖住盖板,将盖好的盖板放入研磨设备中。
  •  以 1500 转/分钟研磨 2 分钟。取下盖垫,将干燥的研磨粉(通过 1 毫米筛)转移到 Porvair P3 过滤
  • 器微孔板(240100)的每个孔中。
  •  准确添加 400ul 甲醇或异丙醇(根据需要)以溶解植物材料中的油性残余物。
  •  在配有 P3 板适配器(229654)的 Porvair Microshake 混匀仪(229651)上以 330 rpm 混匀 10 分钟。
  •  P3 沉淀板中的超疏水玻璃料可以防止泄漏,但为了更加安心,可以使用可选的排水盖垫,如果需要,
  • 应在测定开始前将其安装在板的下侧(219005)。
  •  摇动后,取下排水盖,将 P3 板放在 Porvair Microlute 上歧管(228008),在增压室中有 2ml 收集板。这个收集板可以是另一种子基因组学板(219030)或标准的 2ml 方孔板(219009)。
  •  任何 SLAS / ANSI 格式深孔板都可用于收集步骤,但是 219009 和 219030 使用不含可萃取物的聚丙烯,它不会产生沥滤液。要分析的解决方案。此外,它们的板几何形状经过优化 Porvair Microlute Manifold 使得无需进一步调整以防止孔间交叉污染。施加真空以将纯化的提取物向下吸过过滤器并进入孔中收集板。
  •  使用歧管上的阀门隔离真空供应,并使用针阀释放增压室中的真空。现在可以丢弃过滤板,并且可以将含有有机提取物的收集板带到 HPLC 进行分析。
  •  如果优选分析总 THC 和 CBD,则需要额外的步骤。在这种情况下,THCA 和 CBDA 必须使用热蒸发设备转化为 THC 和 CBD。
  •  取 2ml 含有溶剂提取物的收集板,将其放在 Porvair Minivap 氮吹仪上。  将温度设定为最高(60℃)并蒸发至干燥,继续用热气加热 45 分钟,以使不稳定的 THCA 和 CBDA 解离为 THC 和 CBD。
  • 冷却至室温后,重新悬浮于 400μl 溶剂中,在 Microshake 混匀仪上搅拌以确保良好混合,然后如前所述进行 HPLC 分析。

cannabis

 

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