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使用Porvair 微孔板制备用于分析THC/CBD的大-麻植物样品

更新时间:2021-03-26浏览:1066次

随着用于医学和研究目的的大-麻合法化程度的提高,对其活性成分进行准确,高通量分析的需求急剧增加。

最重要的两个是具有治疗用途的精神活性THC和止痛CBD THCCBD的比例对于区分药用大-麻和休闲大-麻至关重要。这个比例对税务部门,医疗监管者和种植者都非常重要。

THC / CBD比率的确定

准确测定THC / CBD的比例至关重要,这是通过对大-麻叶,芽和花的样品进行有效的样品制备来确定的。传统的样品制备方法已使用拍打或研磨机将这些材料均质化。当在聚丙烯微孔板中进行操作时,这些机器施加的极-端压力通常会损坏孔板,从而导致破裂,渗漏并最终导致交叉污染。分析的目的是确定总THC

这包括无羧酸盐形式(THCA)以及热转化形式THC。医学价值是CBD含量的函数,CBD含量必须再次总计才能包括天然羧酸形式。

高效液相色谱(HPLC)可以在将THCACBD的酸成分转化为相应的游离形式的THCCBD之前鉴定它们的酸成分,因此首-选mouth剂和大-麻产品。

气相色谱(GC)分析的一个缺点是热注射器中THCATBDA的破坏,这可能会使THC / TBD比的最终数据不准确。因此,HPLC / UVLC / MS应该是首-选的分析方法。以下方法也可用于制剂和植物原料。

仪器与方法

Porvair Sciences 2ml深孔种子基因组微孔板219030

Porvair Sciences 96孔盖垫219004

Porvair Sciences Microlute真空歧管228008

Porvair Sciences Microlute P3240100

具有96孔螺旋针头的Porvair Sciences Minivap蒸发器(229206229072

具有3板适配器的Porvair Sciences Microshake微板振荡器(229651229654

Porvair Sciences 2.2毫升方形深孔板(219009

实验室研磨机(例如Spex GenoGrinder

 

对于THC / CBD比率分析,应随机取样大-麻叶,芽和花的样品(如果有)。我们建议在Porvair 229030植物基因组板的每个孔中准确称量约50mg的干燥植物材料。

 3 x 3mm的钢或镍研磨球(如果研磨种子材料,则需要镍)添加到植物基因组板中。

219004盖垫密封板,然后将盖好的板放入GenoGrinder中。

1500 rpm下研磨2分钟。取下盖垫,将干燥的地面粉末(应通过1毫米筛子)转移到Porvair P3滤微孔板(240100的每个孔中。

准确添加400ul甲醇或异丙醇(根据需要)以溶解植物材料中的油性残留物。

Porvair Microshake摇床(229651上用P3板适配器(229654或其他合适的摇床以330 rpm的速度搅拌10分钟。

P3板中的超疏水玻璃料将防止泄漏,但为使您更加省心,可以使用可选的排水盖垫,如果需要,应在测定开始之前将其置于板的底面(219005)。

摇晃后,取下排液盖,将P3板放置在Porvair Microlute歧管(228008)上,该歧管在气室中具有2ml的收集板。该收集板可以是另一个种子基因组板(219030或标准的2ml方孔板(219009。任何SLAS / ANSI格式的深孔板均可用于收集步骤,但是219009219030使用的是无萃取聚丙烯,不会对要分析的溶液产生渗滤液。

此外,其板的几何形状已针对Porvair Microlute歧管进行了优化,因此无需进一步调整即可防止孔之间的交叉污染。抽真空以将纯化的提取液向下抽吸通过过滤器并进入收集板的孔中。使用歧管上的阀隔离真空源,并使用针形阀释放增压室中的真空。现在可以丢弃滤板,可以将含有有机提取物的收集板带入HPLC进行分析。

如果首-选分析总THCCBD,则需要执行额外的步骤。在这种情况下,必须通过加热将THCACBDA转化为THCCBD

2ml含有溶剂提取物的收集板,将其放在Porvair Minivap上。将温度设置为最-高(60℃)并蒸发至干,继续用热气加热45分钟,以使热不稳定的THCACBDA解离为THCCBD。冷却至室温后,将其重新悬浮在400ul的溶剂中,在微摇瓶上摇晃硅藻土以确保充分混合,然后进行HPLC分析。