Microlute TM PLR 血浆和血清中磷脂的去除方案 (实验方案)
使用 Microlute™ PLR 96 孔板或小柱,高效且可重复地去除血浆和血清样品中的磷脂。
向每个孔中加入 50–200 μL 的血浆或血清样品。
向孔中加入 样品体积 3–4 倍的沉淀溶剂,以沉淀蛋白质。
★ 推荐溶剂:1% 甲酸 / 乙腈
★ 可替代溶剂:1% 甲酸 / 甲醇
在洗脱前,将两种溶液充分混合以确保蛋白质沉淀。
★ 选项 1 – 吸液混匀(推荐):
使用手动移液器、自动移液器或自动加液系统上下吸打 3–4 次。
★ 选项 2 – 涡旋混匀:
建议使用高速混合,以获得最佳均匀蛋白沉淀,同时避免飞溅或孔间交叉污染。
★ 真空洗脱:
施加低于-0.1 bar 的真空,持续 3 分钟,或直至样品洗脱。
★ 正压洗脱:
施加低于3 PSI 的压力,持续 3 分钟,或直至样品洗脱。
★ 注意:如果磷脂去除或纯化效果不够理想,可降低真空或压力,以减缓流速。
★ 警告:使用较高的真空或压力可能导致磷脂去除效率下降,并增加其他基质组分(如蛋白质)穿透到样品中的风险。
★ 可直接将洗脱液进样至液相色谱系统 LC;
★ 或者在进样前进行稀释;
★ 或者将洗脱液蒸干,再重溶于更适合分析的溶剂后进样。
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